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ウェスタンブロッティングなどにおけるポジティブコントロールとして使用される、Creative Diagnostics社などのローディングコントロール抗体をご紹介いたします。
ローディングコントロール抗体
ローディングコントロールタンパク質は、ウェスタンブロッティングなどの技術において、タンパク質のローディングをモニターするために日々使用されます。ローディングコントロールタンパク質は一般的に、必ずしもすべての組織や細胞で恒常的であるとは限りませんが、多くの組織や細胞で安定に発現し、多くの場合高いレベルで発現していることから選択されます。ローディングコントロールの発現レベルは組織や実験条件によって異なることがあるので、特定の実験に関連したローディングコントロールを選択することが重要です。これらのタンパク質は、各ウェルのタンパク質負荷量がゲル全体でほぼ等しくなるようにし、データの正規化を容易にします。ローディングコントロールを選択する際には、検出の重複や結果の干渉を避けるため、目的のタンパク質とは異なる分子量のタンパク質を選択することが極めて重要です。
Creative Diagnostics社は、以下のような最も一般的な標的に対する特異性の高い抗体を提供しています。例えば、β-Actin, COX IV, GAPDH, Histone H3, α-およびβ-Tubulinなどです。 同社の抗体は、最適な感度と一貫性を確保するため、徹底した品質管理の下で製造されています。
Creative Diagnostics社ローディングコントロール抗体 by Targets
ACTA1 | ACTB | AGO4 | ATP1A2 |
CETN3 | CFL1 | COX4I1 | DDB1 |
GAPDH | HDAC2 | ヒストンH3 | HSPD1 |
LMNB2 | PCNA | PPIB | TBP |
TF | TUBA4A | TUBB | チューブリン |
VCL | VDAC1/Porin | VDAC2 | YY1 |
Affinity Biosciences社ローディングコントロール抗体
一般的な内部コントロールタンパク質を以下の表に示します。名前をクリックするとメーカーウェブサイトで対応する抗体を検索できます。
kDa | Whole cell | Mitochondrial | Nuclear | Membrane | Cytoskeleton | Serum |
125 | Vinculin | |||||
110 | ATPase | |||||
75 | Transferrin | |||||
66 | Lamin B1 | |||||
60 | HSP60 | |||||
55 | HDAC1 | |||||
50 | Alpha tubulin | Alpha tubulin | ||||
50 | Beta tubulin | Beta tubulin | ||||
40 | Beta actin | Beta actin | ||||
35 | GAPDH | TBP | ||||
30 | VDAC1/Porin | PCNA | ||||
25 | Cyclophilin B | |||||
20 | Cofilin | COX IV | Cofilin | |||
15 | Histone H3 |
ローディングコントロール抗体の選び方
こちらのELK Biotechnology社のウェブサイトをご覧ください。